對在水溶液中形成陰離子的化合物，陰離子交換色譜是有效的分離方法。但其穩(wěn)定性不及反相,隨著進(jìn)樣次數(shù)的增加其保留特性會(huì)逐漸發(fā)生變化，并且在色譜柱的整個(gè)壽命周期中，這種變化較大。

    在離子交換色譜中，存在著3種電離平衡，分別是樣品組分的電離平衡、流動(dòng)相中緩沖溶液的電離平衡、柱上離子交換基團(tuán)的電離平衡。色譜柱保留行為的變化、流動(dòng)相組成的調(diào)整會(huì)綜合影響到上述的電離平衡，這種影響較為復(fù)雜，并不是一致的。如提高流動(dòng)相的pH值會(huì)促進(jìn)流動(dòng)相的電離，增加洗脫強(qiáng)度，減小樣品組分的保留；同時(shí)pH值的增加又會(huì)促進(jìn)樣品的電離，增加樣品組分的保留，還會(huì)抑制色譜柱上硅烷銨鹽的電離，減小樣品組分的保留。樣品組分在柱上的保留時(shí)間取決于上述3種電離平衡的綜合作用。

 

    在色譜柱的不同使用階段使用者可能需要對色譜條件如流動(dòng)相等作出調(diào)整來達(dá)到相似的保留性質(zhì)，即使是相同的被分析物、相同的色譜柱。對陰離子交換色譜可以通過調(diào)節(jié)緩沖溶液的濃度和流動(dòng)相pH來調(diào)節(jié)流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度。